什么是标记基因

标记基因的分类

目的基因和标记（抗药）基因处于同一个质粒上一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增而目的基因则根据情况而定如果只是用来扩增,而不需要在细菌中表达（比如启动子是哺乳动物的）,那目的基因就不会表达,而要转染到动物或人的细胞内才会表达而如果是要用细菌来表达目的基因,则会采用细菌的启动子,这是抗药基因和目的基因同时表达

①　扩增片段长度多态性

(Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP)

AFLP是1995年荷兰科学家Zabeau和Vos等发展起来的一种检测DNA多态性的新方法，文章发表于Nucleic Acids Research。AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物，其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段，再使双链人工接头的酶切片段相边接，作为扩增反应的模板 DNA，然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增，最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA 基因再进行选择性扩增，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测获得的DNA扩增片段，根据扩增片段长度的不同检测出多态性。引物由三部分组成：与人工接头互补的核心碱基序列、限制性内切酶识别序列、引物3’端的选择碱基序列（1—10 bp）。接头与接头相邻的酶切片段的几个碱基序列为结合位点。该技术的独特之处在于所用的专用引物可在知道 DNA 信息的前提下就可对酶切片段进行PCR 扩增。为使酶切浓度大小分布均匀，一般采用两个限制性内切酶，一个酶为多切点，另一个酶切点数较少，因而 AFLP 分析产生的主要是由两个酶共同酶切的片段。AFLP 结合了 RFLP 和 RAPD两种技术的优点，具有分辨率高、稳定性好、效率高的优点。但它的技术费用昂贵，对 DNA 的纯度和内切酶的质量要求很高。尽管 AFLP 技术诞生时间较短，但可称之为分子标记技术的又一次重大突破，被认为是一种十分理想、有效的分子标记。

②　酶切扩增多态性序列

(Cleaved Amplified Polymorphism Sequences，CAPS）　

CAPS技术又称为PCR—RFLP，它实质上是PCR技术与RFLP技术结合的一种方法。CAPS的基本原理是利用己知位点的DNA序列资源设计出一套特异性的PCR引物（19—27bp），然后用这些引物扩增该位点上的某一DNA片段，接着用一种专一性的限制性内切酶切割所得扩增产物，凝胶电泳分离酶切片段，染色并进行RFLP分析。CAPS标记揭示的是特异PCR片段的限制性长度变异的信息。CAPS是一类共显性分子标记，其优点是避免了RFLP分析中膜转印这一步骤，又能保持RFLP分析的精确度。另外，由于很多限制性内切酶均可与扩增DNA酶切，所以检测到多态性机会较大。

标记基因是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位。那么你对标记基因了解多少呢以下是由学习啦小编整理关于什么是标记基因的内容，希望大家喜欢!

　　标记基因的介绍

　　标记基因，原本是基因工程的专属名词，但是现在它已经成为一种基本的实验工具，广泛应用于分子生物学、细胞生物学、发育生物学等方面的研究。

　　标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位。

　　标记基因的分类

　　引入“选择基因”和“报告基因”的概念

　　选择基因和报告基因都可以看做是标记基因，都起着标记目的基因是否成功转化的作用，但是它们又有着各自的特点。

　　选择基因(又称选择标记基因)，主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依赖外界筛选压力(如抗生素、除草剂)等缺陷。而报告基因则是指其编码产物能够被快速测定、且不依赖于外界压力的一类基因。

　　理想的报告基因通常具备如下基本要求：①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性;②、它的产物是唯一的，且不会损害受体细胞;③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。

分子标记是生物遗传标记的一种通过引物设计的不同,用PCR的方法在生物的基因组DNA上扩增出相关条带,通过电泳、软件识别、分析,可用作生物遗传信息的研究 分子标记种类有很多,第一代分子标记以RFLP为代表,是基于酶切位点的多态性开发的分子标记 第二代分子标记以SSR为代表,是基于简单重复序列的多态性第二代分子标记通过引物的特殊设计,能够扩增DNA上的相应位置的序列,根据它们的多态性,进行下一步分析 第三代分子标记以SNP为代表,单核苷酸多态性是基于高通量测序为基础的新一代分子标记技术